大腸菌群、大腸桿菌檢測時,所用培養(yǎng)基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管(杜氏管)考察產(chǎn)氣的培養(yǎng)基,滅菌后,偶爾會有小氣泡留在小倒管內(nèi),導(dǎo)致培養(yǎng)基不能使用。重復(fù)滅菌不僅費時,更重要的是會破壞培養(yǎng)基的有效成分。為了避免這類問題的發(fā)生,我公司實驗室根據(jù)實驗經(jīng)驗,做出以下幾種可能原因分析:
原因一:高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能完全排出
高壓鍋在滅菌過程中產(chǎn)生的最大壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)的氣體擠出,導(dǎo)致滅菌后任留有小氣泡。此外,高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度,也會出現(xiàn)類似現(xiàn)象。
解決辦法:使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡,對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監(jiān)測。
原因二:試管塞塞得太緊
在滅菌時,試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會導(dǎo)致試管內(nèi)壓力與滅菌鍋內(nèi)壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時,鍋內(nèi)壓力會大于試管內(nèi)壓力,試管內(nèi)壓力不夠,不能將小倒管內(nèi)氣體排盡,就留有氣泡;當滅菌鍋降溫降壓時,鍋內(nèi)壓力小于管內(nèi)壓力,可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出,培養(yǎng)基報廢。
解決辦法:改用塑料帽、不銹鋼管帽,或者與試管相匹配的硅膠塞。
原因三:小倒管口太小
小倒管在加熱加壓后,一方面液體培養(yǎng)基要進入小倒管,另一方面小倒管內(nèi)部的空氣要被排出,如果小倒管管口太小,液體不容易進去,里面的空氣不容易被排出,就會導(dǎo)致有小氣泡生成。
解決辦法:改用開口比較大的倒管。